JP-2025516571-A5 -

Dates

Publication Date

20260512

Application Date

20230510

Description

いくつかの態様では、座位は、ハウスキーピング遺伝子の座位である。いくつかの実施形態では、座位は、膵島、例えば、ヒト膵島のすべての細胞で構成的に発現される。いくつかの実施形態では、座位は、β細胞、例えば、ヒトβ細胞で構成的に発現される。いくつかの実施形態では、ハウスキーピング遺伝子は、アクチン、ユビキチン、及びＧＡＰＤＨからなる群から選択される。いくつかの態様では、１つ以上の免疫調節剤は、サイトカインである。いくつかの態様では、１つ以上の免疫調節剤は、ＩＬ－１０、ＴＧＦ－β、及びＩＬ－２、ならびに改変ＩＬ－２からなる群から選択される。 本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。 （項目１） 幹細胞または前駆細胞の所望の分化した細胞タイプへの分化の間にサイレンシングされない前記幹細胞または前駆細胞の１つ以上の座位から１つ以上の寛容原性導入遺伝子を発現するように操作された、低免疫原性細胞。 （項目２） 前記細胞が、幹細胞である、項目１に記載の低免疫原性細胞。 （項目３） 前記細胞が、誘導多能性細胞である、項目１に記載の低免疫原性細胞。 （項目４） 前記細胞が、前駆細胞である、項目１に記載の低免疫原性細胞。 （項目５） 前記細胞が、β細胞前駆細胞である、項目１に記載の低免疫原性細胞。 （項目６） 前記細胞が、分化した細胞である、項目１に記載の低免疫原性細胞。 （項目７） 前記細胞が、β細胞である、項目１に記載の低免疫原性細胞。 （項目８） 前記１つ以上の座位が、ハウスキーピング遺伝子の座位である、項目１に記載の低免疫原性細胞。 （項目９） 前記ハウスキーピング遺伝子が、アクチン、ユビキチン、及びＧＡＰＤＨからなる群から選択される、項目８に記載の低免疫原性細胞。 （項目１０） 前記１つ以上の寛容原性導入遺伝子が、ＰＤＬ１、ＨＬＡ－Ｅ／Ｇ、ＣＤ４７、ＳＥＲＰＩＮＢ９、ＣＣＬ２１、ＦＡＳＬ、ＣＤ２００、ＭＦＧＥ８、ＣＤ５５、ＣＤ４６、ＨＬＳ－Ｇ単鎖融合体、可溶性ＰＤＬ１－Ｉｇ及びＣＴＬＡ４－Ｉｇからなる群から選択される、項目１に記載の低免疫原性細胞。 （項目１１） 前記１つ以上の寛容原性導入遺伝子が、ＨＬＡ－Ｅ単鎖融合体である、項目１に記載の低免疫原性細胞。 （項目１２） 前記単鎖融合体に、ＮＫ細胞を活性化することができるペプチドがロードされている、項目１１に記載の低免疫原性細胞。 （項目１３） 前記ペプチドが、阻害性受容体ＮＫＧ２Ａ及び／またはＮＫＧ２Ｃとの相互作用を介してＮＫ細胞を活性化する、項目１２に記載の低免疫原性細胞。 （項目１４） 前記ペプチドが、ＶＭＡＰＲＴＬＬＬ（配列番号２）、ＶＭＡＰＲＴＬＬ（配列番号３）、ＶＭＡＰＲＴＬＦＬ（配列番号４）、ＶＭＡＰＲＴＬＶＬ（配列番号５）、ＶＭＡＰＲＴＬＩＬ（配列番号６）、ＩＭＡＰＲＴＬＶＬ（配列番号７）、ＶＭＰＰＲＴＬＬＬ（配列番号８）、ＶＭＡＰＲＴＶＬＬ（配列番号９）、ＶＴＡＰＲＴＬＬＬ（配列番号１０）、ＶＴＡＰＲＴＶＬＬ（配列番号１１）、ＶＭＡＰＲＴＬＴＬ（配列番号１２）及びＶＭＡＰＲＡＬＬＬ（配列番号１３）からなる群から選択される、項目１２に記載の低免疫原性細胞。 （項目１５） 前記細胞が、ＨＬＡクラスＩ欠損である、項目１に記載の低免疫原性細胞。 （項目１６） Ｂ２Ｍ遺伝子の発現が消失している、項目１５に記載の低免疫原性細胞。 （項目１７） 低免疫原性細胞を生成する方法であって、幹細胞または前駆細胞を、前記細胞の所望の細胞タイプへの分化の間にサイレンシングされない前記幹細胞または前駆細胞の座位から１つ以上の寛容原性導入遺伝子を発現するように操作することと、前記幹細胞または前駆細胞を、前記幹細胞または前駆細胞が所望の細胞タイプに分化するのに適した条件に曝露することと、を含む、方法。 （項目１８） 前記幹細胞が誘導多能性細胞である、項目１７に記載の方法。 （項目１９） 前記前駆細胞がβ細胞前駆細胞である、項目１７に記載の方法。 （項目２０） 前記所望の細胞タイプが、β細胞である、項目１７に記載の方法。 （項目２１） 前記座位が、膵島のすべての細胞で構成的に発現される、項目１７に記載の方法。 （項目２２） 前記座位が、ヒト膵島のすべての細胞で構成的に発現される、項目１７に記載の方法。 （項目２３） 前記座位が、β細胞で構成的に発現される、項目１７に記載の方法。 （項目２４） 前記座位が、ヒトβ細胞で構成的に発現される、項目１７に記載の方法。 （項目２５） 前記座位が、ハウスキーピング遺伝子の座位である、項目１７に記載の方法。 （項目２６） 前記ハウスキーピング遺伝子が、アクチン、ユビキチン、及びＧＡＰＤＨからなる群から選択される、項目２５に記載の方法。 （項目２７） 前記ハウスキーピング遺伝子がＧＡＰＤＨである、項目２６に記載の方法。 （項目２８） 前記１つ以上の寛容原性導入遺伝子が、ＰＤＬ１、ＨＬＡ－Ｅ／Ｇ、ＣＤ４７、ＳＥＲＰＩＮＢ９、ＣＣＬ２１、ＦＡＳＬ、ＣＤ２００、ＭＦＧＥ８、ＣＤ５５、ＣＤ４６、ＨＬＳ－Ｇ単鎖融合体、可溶性ＰＤＬ１－Ｉｇ及びＣＴＬＡ４－Ｉｇからなる群から選択される、項目１７に記載の方法。 （項目２９） 前記寛容原性導入遺伝子が、ＨＬＡ－Ｅ単鎖融合体である、項目１７に記載の方法。 （項目３０） 前記単鎖融合体に、ＮＫ細胞を活性化することができるペプチドがロードされる、項目２９に記載の方法。 （項目３１）