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JP-2026514748-A - α－ガラクトシルセラミド化合物を送達するための組成物および方法

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Abstract

がんや、ウイルスまたは細菌感染症などの疾患を治療するための組成物および方法を記載する。より具体的には、提供する組成物が、封入されたＣＤ１ｄ拘束性インバリアントナチュラルキラーＴ細胞抗原である細菌性α－ガラクトシルセラミドを含む。 【選択図】図１

Inventors

  • ブランバット、 ヒマンシュ
  • マックディアミド、 ジェニファー

Assignees

  • エンジーンアイシー モレキュラー デリバリー ピーティーワイ リミテッド

Dates

Publication Date
20260513
Application Date
20240416
Priority Date
20230417

Claims (13)

  1. （ａ）薬学的に許容される担体と； （ｂ）完全な細菌由来のミニセル、完全な死滅細菌細胞、完全な哺乳類細胞、および細胞外小胞から選択される複数の送達成分と、 を含む組成物であって、前記送達成分がα－ガラクトシルセラミド化合物を含み、該α－ガラクトシルセラミド化合物が、 （ｉ）（ｉ）炭素長１６～１７のＮ－アシル鎖と、（ｉｉ）α－炭素ではなくβ－炭素上のヒドロキシ基と、を含み、 （ｉｉ）そのスフィンゴイド塩基上に４－ヒドロキシ基を有さず、 前記化合物が、ｉＮＫＴ細胞を活性化するように、生体内でＣＤ１ｄ－脂質－ＴＣＲ三量体複合体を形成することができる、組成物。
  2. 前記化合物が、（ｉｉｉ）イソ分岐脂質末端をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
  3. 前記送達成分の少なくとも一部が、ナチュラルキラー細胞、樹状細胞、およびマクロファージからなる群から選択される哺乳類細胞である、請求項１または請求項２に記載の組成物。
  4. 前記送達成分の少なくとも一部が、完全な細菌由来のミニセルである、請求項１または請求項２に記載の組成物。
  5. 前記送達成分の少なくとも一部が、細胞外小胞である、請求項１または請求項２に記載の組成物。
  6. 前記化合物が、共生細菌による試験管内での発現後に医薬品グレードに精製されている、請求項１～５のいずれかに記載の組成物。
  7. 前記化合物が、９７％～９９％の範囲のレベルに精製されている、請求項６に記載の組成物。
  8. 前記細菌が、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｖｕｌｇａｔｕｓ、およびＰｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｐｒｉからなる群から選択される、請求項６または請求項７に記載の組成物。
  9. 前記細菌がＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓである、請求項８に記載の組成物。
  10. 前記化合物がα－ＧａｌＣｅｒ Ｂｆ である、請求項９に記載の組成物。
  11. 単回使用のバイアルを含んで構成される剤形であって、該バイアルが、治療上有効な用量の請求項１に記載のα－ＧａｌＣｅｒ化合物を含むように、該化合物を充填した約１×１０ １０ ～約１×１０ １１ のミニセルを含む、剤形。
  12. ウイルスもしくは細菌感染症を治療する方法、またはウイルスもしくは細菌感染症に対する予防接種をする方法であって、該治療または予防接種を必要とする対象に、治療上有効な量の請求項１～１０のいずれか一項に記載の組成物を投与することを含む、方法。
  13. がんを治療する方法であって、がん病変を患う対象に、治療上有効な量の請求項１～１０のいずれか一項に記載の組成物を投与することを含む、方法。

Description

本出願は、２０２３年４月１７日に出願された米国仮特許出願第６３／４５９，９４０号の３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．§１１９（ｅ）に基づく利益を主張するものであり、その内容全体が参照により本明細書に援用される。 本技術は概して、治療の目的でα－ガラクトシルセラミド分子の一種を調製し送達する分野に関する。 セレブロシドはスフィンゴ糖脂質（ＧＳＬ）ファミリーに属し、生体系における幅広い組織、器官、および神経細胞膜の重要な構成成分である。セレブロシドは、極性残基（単糖または多糖）に結合した、２本の長い脂肪鎖を有するセラミド部分からなる。 ヒトを含む高等生物におけるＧＳＬファミリーの中で最もよく知られているのがガラクトセラミド（ＧａｌＣｅｒ）であり、Ｄ－エリスロ－スフィンゴシンと長鎖脂肪酸からなるセラミド（Ｃｅｒ）にβ１－１’－グリコシド結合でＤ－ガラクトース（Ｇａｌ）残基が結合してなる。スフィンゴシンに結合している脂肪酸の長さはさまざまで（Ｃ１４－Ｃ２６）、ステアリン酸（Ｃ１８）が最も多い。ガラクトシルセラミドは長鎖のα－ヒドロキシ脂肪酸（Ｃ１８－Ｃ２６）を多く含む。 他の脂質の中でもＧＳＬは、Ｔリンパ球およびＮＫ細胞に典型的なマーカーの発現を特徴とするナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞と呼ばれるＴリンパ球のサブセットに提示されると、細胞媒介性免疫を誘発することができる。ＮＫＴ細胞はさらに、Ｉ型またはインバリアント（ｉｎｖａｒｉａｎｔ）ナチュラルキラー（ｉＮＫＴ）細胞と、ＩＩ型または非ｉＮＫＴ細胞とに分けられる。 ｉＮＫＴ細胞は脂質抗原を認識し結合するが、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）の種類が限定されていることを特徴とする。脂質抗原は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）によって発現される非多型性（ｍｏｎｏｍｏｒｐｈｉｃ）ＨＬＡクラスＩ関連分子であるＣＤ１タンパク質分子によって抗原が提示された場合のみ、ｉＮＫＴ細胞のＴＣＲに認識され、結合される。ヒトにおいて、ＣＤ１アイソフォームは、ＣＤ１ａ、ＣＤ１ｂ、ＣＤ１ｃ、およびＣＤ１ｅに代表されるグループＩと、ＣＤ１ｄに代表されるグループＩＩとに分けられる。各ＣＤ１は所定のセットのＧＳＬに結合し、組織特異的に発現し、特定の種類のＴＣＲを有するＴ細胞に抗原を提示する。 キリンビールでは、海洋天然物の抗腫瘍活性のスクリーニングを行い、肥塚およびその同僚らによって、沖縄の海綿動物であるＡｇｅｌａｓ ｍａｕｒｉｔｉａｎｕｓから単離したガラクトシルセラミド糖脂質の一種「アゲラスフィン類（ａｇｅｌａｓｐｈｉｎｓ）」が発見された。リンパ球の増殖を引き起こすことが見出されたこれらのアゲラスフィン類は、糖とセラミドとの間にα－グリコシド結合を有するものであった。この後者の特徴が、高等生物に見られるグリコシルセラミドに典型的なβ－グリコシド結合とは対照的であった。 図１は、この部類に含まれるアゲラスフィン９ｂを、セラミドのナンバリングとともに示す。アゲラスフィン９ｂのアシル鎖長を２炭素伸長することで、同じく図１に示した合成α－ガラクトシルセラミド（α－ＧａｌＣｅｒ）である、ＫＲＮ７０００（Ｗｉｅｌａｎｄ Ｂｒｏｗｎ，２０１３）がもたらされた。元のアゲラスフィン類と比較すると、ＫＲＮ７０００は脂肪酸アシル鎖の２位にヒドロキシ基を有さない。図１に示すように、ＫＲＮ７０００はスフィンゴシン鎖上に４－ヒドロキシ基も有しているが、アゲラスフィン類の中には、これを欠くものもある。 ＡＰＣのＣＤ１ｄによって提示されると、ＫＲＮ７０００がｉＮＫＴ細胞を著しく刺激することが証明されている。提示された脂質－ＣＤ１ｄ複合体とｉＮＫＴ細胞のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）との相互作用によって、安定な三量体複合体（ＣＤ１ｄ：：脂質－ＴＣＲ）を形成することができ、この三量体複合体が、ｉＮＫＴ細胞を活性化し、細胞間コミュニケーションに関与する多様なシグナル伝達分子、サイトカイン、およびケモカインの放出を引き起こす前提条件となる（Ｋｒｏｎｅｎｂｅｒｇ，２００５；Ｖａｒｔａｂｅｄｉａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。このように、ＣＤ１ｄを発現するＡＰＣによってＫＲＮ７０００が提示されると、ｉＮＫＴが活性化され、大部分はＩＦＮ－γであるがＩＬ－４をも速やかに大量に産生し、累積的にＮＫ細胞、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞、Ｂ細胞、好中球、マクロファージ、ならびに樹状細胞を活性化し、これらの相互作用によって、腫瘍と闘い、抗菌機能を発揮し（Ｔｈ１）、または自己免疫疾患から保護する（Ｔｈ２）。 ＫＮＲ７０００の前臨床試験によって示唆された治療可能性（Ｎａｋａｇａｗａ ｅｔ ａｌ．，１９９８；Ｈａｙａｋａｗａ ｅｔ ａｌ．，２００１；Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，２０１１ａ）は、この糖脂質を用いた臨床経験から生じたものではない。難治性固形がん患者を対象とした最初の第１相試験（Ｇｉａｃｃｏｎｅ ｅｔ ａｌ．，２００２）では、ＫＲＮ７０００の静脈内（ｉ．ｖ．）投与によって、少なくとも１週間は一時的に循環ｉＮＫＴ細胞の数が減少し、ＧＭ－ＣＳＦおよびＴＮＦ－αレベルが上昇したが、これは治療前のｉＮＫＴレベルが比較的高い患者においてのみであり、全体として有意な臨床効果は認められなかった（Ｗａｌｄｏｗｓｋａ ｅｔ ａｌ．，２０１７）。同様の結果が他の臨床試験でも得られ、ＫＲＮ７０００の静脈内投与後に免疫反応の欠如が観察された（Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，２０１１ａ，ｂ）。ＫＲＮ７０００で処置した患者において、免疫学的、生化学的、さらには臨床的応答まで認められたが、これらの結果は概して一貫性を欠いていた（Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，２０１１ｂ）。 ＫＮＲ７０００の有効性は、この糖脂質によって誘発されるＴｈ１サイトカイン（ＩＦＮ－γ）とＴｈ２サイトカイン（ＩＬ－４）との拮抗作用によって制約されると考えられてきた。このため、選択的なＴｈ１またはＴｈ２活性剤を開発するために、多くのα－ＧａｌＣｅｒ類似体が合成され（Ｂｌａｕｖｅｌｔ ｅｔ ａｌ．，２００８；Ｃｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００７；Ｃｈｉｂａ ｅｔ ａｌ．，２００４；Ｆｕｊｉｏ ｅｔ ａｌ．，２００６；Ｈｕｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００７；Ｋａｉｅｄａ ｅｔ ａｌ．，２００７；Ｌｉａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００８；Ｖｅｌｍｏｕｒｏｕｇａｎｅ ｅｔ ａｌ．，２００９；Ｗｕ ｅｔ ａｌ．，２００６）、その免疫調節活性がＣＤ１ｄへの結合親和性に関連することが示された（Ｆｕｊｉｏ ｅｔ ａｌ．，２００６）。 例えば、多数のＣＤ１ｄを用いた研究を通して、ｉＮＫＴ細胞によるＩＦＮ－γおよびＩＬ－４の分泌が、α－ＧａｌＣｅｒ類似体のＣＤ１ｄへの結合によって決定されることが確立され（Ｌｉａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００８）、ＣＤ１ｄに対する親和性が高いほどサイトカイン放出プロフィールは、より強いＴｈ１応答へとシフトすると考えられた（Ｃｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００７；Ｌｉａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００８）。さらに、アシル鎖末端にさまざまなアリール部分を有するα－ＧａｌＣｅｒ類似体が、強いＴｈ１偏向を伴う強力なｉＮＫＴ活性を示している。このような誘導体の１つである７ＤＷ８－５は、マウスにおいてマラリアおよびＨＩＶ抗原を用いた試験をしたところ、他のα－ＧａｌＣｅｒ類似体に比べて優れたアジュバント活性を示した（Ｐａｄｔｅ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。別のα－ＧａｌＣｅｒ誘導体では、１，２，３－トリアゾール部分がα－ＧａｌＣｅｒ骨格のアミド結合を置換した結果、放出されるサイトカインのＩＬ－４対ＩＦＮ－γ偏向を高めた（Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，２００７）。 上述の通り、ＫＲＮ７０００は、１９９０年代に海綿動物の１種、Ａｇｅｌａｓ ｍａｕｒｉｔｉａｎｕｓから単離された糖脂質であるアゲラスフィン９ｂの合成誘導体である（Ｂａｎｃｈｅｔ－Ｃａｄｅｄｄｕ ｅｔ ａｌ．，２０１１）。当時も今も、なぜ海綿動物の糖脂質がＫＲＮ７０００のように哺乳類ｉＮＫＴ細胞の強力な活性剤の主成分となりうるのか明らかではない。 ＫＲＮ７０００の化学構造に類似する２つのスフィンゴ糖脂質が、リポ多糖（ＬＰＳ）を欠くグラム陰性菌であるスフィンゴモナス属（Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ）種によって産生されるとの発見によって、１つの可能性が示唆されている。より具体的には、α－グルクロノシルセラミド（α－ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｓｙｌｃｅｒａｍｉｄｅ：ＧＳＬ－１）がＳｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ ｃａｐｓｕｌａｔｅの細胞壁から単離され、α－ガラクツロノシルセラミド（α－ｇａｌａｃｔｕｒｏｎｏｓｙｌｃｅｒａｍｉｄｅ：ＧＳＬ－１’）がＳ．ｙａｎｏｉｋｕｙａｅおよびＳ．ｗｉｔｔｉｃｈｉｉから単離された（Ｔｓｕｊｉ，２００６）。 スフィンゴモナス属種の細胞壁に豊富に存在するモノグリコシルセラミドファミリーが、ＬＰＳの代わりとなっているかもしれない。いずれにせよ、ＧＳＬ－１およびＧＳＬ－１’のいずれも試験管内（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）でマウスおよびヒトのＮＫＴ細胞を刺激することが示されており、フローサイトメトリーによるデータは、いずれの糖脂質も実際にＣＤ１ｄ分子に結合し、ＮＫＴ細胞に認識されることを示している（同文献）。 ＫＲＮ７０００と比べると、ＧＳＬ－１およびＧＳＬ－１’のグルクロン酸およびガラクツロン酸は、それぞれ炭素６位にカルボキシル基を有する。さらに、スフィンゴモナス属由来のスフィンゴ糖脂質は、脂肪酸アシル鎖の炭素２位にヒドロキシ基を有しているため、海綿動物本来のアゲラスフィン類により類似している。加えて、スフィンゴモナス属由来のスフィンゴ糖脂質のスフィンゴシン鎖で４－ヒドロキシ基を欠くことは、アゲラスフィン類の一部の構造に反映されている。概して、Ｔｓｕｊｉ，２００６参照。 これらの観察は、日本の南部付近の太平洋の貧栄養海域でＳｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ ａｌａｓｋｅｎｓｉｓ（別名Ｓｐｈｉｎｇｏｐｙｘｉｓ ａｌａｓｋｅｎｓｉｓ）が極めて多量に発見されたことを考慮すると、さらに重要な意味を持つ。このように、アゲラスフィン類はＡ．ｍａｕｒｉｔｉａｎｕｓ海綿動物自体によって産生されるのではなく、これらの海綿動物にくっつき、あるいはこれらの海綿動物に摂取され取り込まれたスフィンゴモナス属様の細菌によって産生されている可能性が高い。 同様に、哺乳類生物とＫＲＮ７０００との自然な接触が、内因性の産生によって生じるのか、あるいは微生物源によって生じるのか判然としないままである。ＫＲＮ７０００がＮＫＴ細胞の活性剤であり、一部のがんやウイルス感染症における免疫応答の媒介物質であることが示されているが（Ｋｏ ｅｔ ａｌ．，２００５）、ＫＲＮ７０００は哺乳類によって産生されるものではない。加えて、β－ＧａｌＣｅｒが免疫反応を誘発しうるとの証拠も欠如している。 他方、ヒトの腸内共生細菌Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓは、ＣＤ１ｄを介したｉＮＫＴ細胞活性化のための天然リガンドであって、ＫＲＮ７０００と類似の免疫特性を有するα－ＧａｌＣｅｒ分子である、α－ＧａｌＣｅｒＢｆを産生することが実証されている（Ｗｉｅｌａｎｄ Ｂｒｏｗｎ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。この研究に基づいて、ヒト腸内マイクロバイオームからさらに２つの菌株、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｖｕｌｇａｔｕｓおよびＰｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｐｒｉがα－ＧａｌＣｅｒ分子を産生することが示された（ｖｏｎ Ｇｅｒｉｃｈｔｅｎ ｅｔ ａｌ．，２０１７）。さらに、マウスの大腸から単離されたα－ＧａｌＣｅｒ分子は、α－ＧａｌＣｅｒＭＬＩと呼ばれ、おそらくバクテロイデス属（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）源からの細菌由来であることが実証されている（ｖｏｎ Ｇｅｒｉｃｈｔｅｎ ｅｔ ａｌ．）。 したがっ