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JP-2026514761-A - 再構成可能な乾燥粉末製剤及びその使用方法

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Abstract

本開示は、非経口投与のための再構成ｍＲＮＡ乾燥粉末粒子の使用を目的とする。本開示はまた、最適な熱安定性及びインビボ発現のために適切な賦形剤を補充した乾燥粉末粒子を生成する方法を目的とする。

Inventors

  • アシシュ・サロード
  • シュリーラン・カルヴィ
  • プリヤール・パテル

Assignees

  • サノフィ ワクチンズ ユーエス インコーポレイテッド

Dates

Publication Date
20260513
Application Date
20240417
Priority Date
20230417

Claims (20)

  1. 再構成のための乾燥粉末製剤であって、 （ａ）スクロース又はトレハロースである賦形剤と、 （ｂ）１つ以上の脂質によって封入されたメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）と、 を含み、 （ａ）の前記賦形剤と（ｂ）の前記ＬＮＰ中の総脂質とが、少なくとも約５の重量比を有する、乾燥粉末製剤。
  2. 前記賦形剤が、スクロースである、請求項１に記載の乾燥粉末製剤。
  3. 前記賦形剤が、トレハロースである、請求項１に記載の乾燥粉末製剤。
  4. 前記ＬＮＰ中の前記総脂質に対する前記賦形剤の重量比が、少なくとも約５．６、少なくとも約１１、又は少なくとも約１５である、請求項１～３のいずれか一項に記載の乾燥粉末製剤。
  5. 前記総脂質に対する前記賦形剤の重量比が、少なくとも約１１．１又は少なくとも約１５．６である、請求項４に記載の乾燥粉末製剤。
  6. 前記ＬＮＰが、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、及び１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の乾燥粉末製剤。
  7. 再構成のための乾燥粉末製剤であって、 （ａ）糖又は糖アルコールである賦形剤と、 （ｂ）１つ以上の脂質によって封入されたメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）と、 を含み、 （ｂ）の前記ＬＮＰ中の総脂質に対する（ａ）の前記賦形剤の重量比が、少なくとも約５である、乾燥粉末製剤。
  8. 前記糖又は糖アルコールが、スクロース、マンニトール、キシリトール、ラクトース、又はトレハロースである、請求項７に記載の乾燥粉末製剤。
  9. 前記糖又は糖アルコールが、トレハロースである、請求項７に記載の乾燥粉末製剤。
  10. 前記糖又は糖アルコールが、スクロースである、請求項７に記載の乾燥粉末製剤。
  11. 前記ＬＮＰ中の前記総脂質に対する前記糖又は糖アルコールの重量比が、少なくとも約５．６、少なくとも約１１、又は少なくとも約１５である、請求項７～１０のいずれか一項に記載の乾燥粉末製剤。
  12. 前記ＬＮＰ中の前記総脂質に対する前記糖又は糖アルコールの重量比が、少なくとも約１１．１又は少なくとも約１５．６である、請求項７に記載の乾燥粉末製剤。
  13. 前記ＬＮＰが、１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の非カチオン性脂質、及び１つ以上のＰＥＧ修飾脂質を含む、請求項７～１２のいずれか一項に記載の乾燥粉末製剤。
  14. 前記再構成乾燥粉末製剤の粒径が、約１２０ｎｍ未満である、請求項１～１３のいずれか一項に記載の乾燥粉末製剤。
  15. 封入率が、約６０％超である、請求項１～１４のいずれか一項に記載の乾燥粉末製剤。
  16. 前記乾燥粉末の粒径が、約５μｍ未満である、請求項１～１５のいずれか一項に記載の乾燥粉末製剤。
  17. 前記乾燥粉末製剤が、長期保存後、例えば、２～８℃で（例えば、４℃で）長期保存後に安定である、請求項１～１６のいずれか一項に記載の乾燥粉末製剤。
  18. 前記ｍＲＮＡが、保存後に、例えば、２～８℃（例えば、４℃）で少なくとも約６ヶ月間保存した後に、約８０％以上の完全性を維持する、請求項１７に記載の乾燥粉末製剤。
  19. 前記ｍＲＮＡが、例えば、２～８℃（例えば、４℃）で最大約１年間保存した後に、約８０％以上の完全性を維持する、請求項１８に記載の乾燥粉末製剤。
  20. 前記ｍＲＮＡが、任意選択で、２～８℃（例えば、４℃）で少なくとも１年間保存した後にｍＲＮＡ完全性が測定される場合、約８０％以上の完全性を維持する、請求項１９に記載の乾燥粉末製剤。

Description

メッセンジャーＲＮＡ療法（ＭＲＴ）は、様々な疾患の治療のための重要なアプローチである。動物におけるタンパク質の産生のためのインビトロ転写されたｍＲＮＡの使用は、１９９０年代に初めて報告された。バイオテクノロジーの進歩に伴い、ｍＲＮＡの安定性及び免疫原性は、ヒトの臨床環境で有用であるように最適化されている。しかしながら、安全且つ効率的なインビボ送達は、ｍＲＮＡ治療薬開発における依然として大きな障害である。 ｍＲＮＡの乾燥粉末製剤（肺への吸入送達を含む）は、有用且つ有利であり得る。再構成可能な乾燥粉末製剤は、例えば、非経口投与などの他の投与経路に有用な改善された製剤のためなど、追加の利点を提供することができる。特に、ｍＲＮＡ－ＬＮＰの熱安定性及び再構成可能な乾燥粉末製剤の両方を開発するという課題を克服することは、例えば、非経口投与に適した乾燥粉末製剤の開発における課題を提示した。再構成可能な乾燥粉末製剤を含む、改善された乾燥粉末製剤が依然として必要とされている。 賦形剤が十分に噴霧乾燥しなかった場合の、それぞれキシリトール及びラクトースを用いたｍＲＮＡ－ＬＮＰ製剤を使用して製造された乾燥粉末製品（ＤＰＰ）を示す。液体製剤は、サイクロン分離器に付着し、乾燥粉末製品は収集容器に回収されなかった。実施例２に記載されているように、水単独（左）と比較して、４００倍の倍率下で賦形剤として７％（ｗ／ｖ）のマンニトール（右）を用いた再構成された乾燥粉末（ＤＰ）において観察された凝集体を示す。実施例２に記載されているように、賦形剤として７％（左）、５％（中央）、及び２．５％（ｗ／ｖ）のマンニトールを用いた（右）再構成された乾燥粉末の外観を示す。実施例２に記載されているように、水単独（左）と比較して、顕微鏡下で賦形剤として５％（ｗ／ｖ）のスクロースを用いた（右）再構成されたＤＰにおいて凝集体が観察されなかったことを示す。実施例２に記載されているように、賦形剤として７％（左）、５％（中央）、及び２．５％（ｗ／ｖ）のスクロースを用いた（右）再構成された乾燥粉末の外観を示す。実施例２に記載されているように、賦形剤として２．５％（ｗ／ｖ）のスクロースを用いたｍＲＮＡ－ＬＮＰ製剤を使用して製造されたＤＰＰが十分に噴霧乾燥せず、液体製剤がサイクロン分離器に付着したことを示す。実施例２に記載されているように、賦形剤として７％（右）、５％（中央）、及び２．５％（ｗ／ｖ）のトレハロース（左）を用いた再構成された乾燥粉末の外観を示す。実施例２に記載されているように、賦形剤として１．２５％（ｗ／ｖ）のトレハロースを用いた再構成された乾燥粉末の外観を示す。実施例２に記載されているように、水単独（左）と比較して、顕微鏡下で賦形剤として２．５％（ｗ／ｖ）のトレハロースを用いた（右）再構成されたＤＰにおいて凝集体が観察されなかったことを示す。実施例２に記載されているように、賦形剤として７％（ｗ／ｖ）のトレハロースを用いたｍＲＮＡ－ＬＮＰ製剤（右）と比較して、賦形剤として１．２５％（ｗ／ｖ）のトレハロースを用いたｍＲＮＡ－ＬＮＰ製剤を使用して製造されたＤＰＰが、十分に噴霧乾燥せず、液体製剤の大部分がサイクロン分離器に付着し、収集容器にわずかの乾燥粉末のみが回収されたこと（中央）を示す。実施例２に記載されているように、再構成溶媒の一部として添加されたトレハロースを用いた再構成された乾燥粉末の外観を示す。示される濃度（７％及び５％（ｗ／ｖ））は、再構成後の組成物中のトレハロースの濃度である。様々な温度（２５℃、４℃、又は－２０℃）で１２ヶ月間にわたる、５％（ｗ／ｖ）のトレハロースを用いた再構成後の組成物における粒径の変化（図６Ａ）、多分散性指数（ＰＤＩ；図６Ｂ）、封入効率（ＥＥ；図６Ｃ）、及びｍＲＮＡ完全性（図６Ｄ）を示すグラフである。同上。９ヶ月間の保存後のそれぞれ２５℃、４℃及び－２０℃でキャピラリー電気泳動によって測定した場合の５％（ｗ／ｖ）のトレハロースを用いた再構成後の組成物のｍＲＮＡ完全性を示す。同上。同上。６ヶ月間の保存後のそれぞれ２５℃、４℃及び－２０℃でキャピラリー電気泳動によって測定した場合の５％（ｗ／ｖ）のトレハロースを用いた再構成後の組成物のｍＲＮＡ完全性を示す。同上。同上。３ヶ月間の保存後のそれぞれ２５℃、４℃及び－２０℃でキャピラリー電気泳動によって測定した場合の５％（ｗ／ｖ）のトレハロースを用いた再構成後組成物のｍＲＮＡ完全性を示す。同上。同上。対照としてのｍＲＮＡ標準物質のキャピラリー電気泳動プロットを示す。実施例５に記載されているように、トレハロース乾燥粉末（「トレハロースＤＰ」）が再構成後に、対照ｍＲＮＡ（「標準」）と比較して、噴霧乾燥後のｍＲＮＡ完全性における変化を示さないことを示すグラフである。液体対照及び再構成されたトレハロース乾燥粉末の静脈内注射後のマウスにおけるＯＴＣ発現を示すグラフである。液体対照及び再構成されたトレハロース乾燥粉末の筋肉内注射後のマウスにおけるヒトエリスロポエチン（ｈＥＰＯ）発現を示すグラフである。実施例８に記載されているように、２～８℃で１２ヶ月間にわたって保存された後の、３つの異なるＤＰＰについての粒径、ＰＤＩ、封入効率、及びｍＲＮＡ完全性において有意な変化がなかったことを示すグラフである。図１０Ａはまた、１２ヶ月間にわたってｈＥＰＯ発現において有意な変化がなかったことを示す。図１０Ａ：ｈＥＰＯをコードするｍＲＮＡを含有するＤＰＰ（「ｃＫＫ－Ｅ１０－ｈＥＰＯ乾燥粉末」）；図１０Ｂ：インフルエンザ抗原をコードするｍＲＮＡを含有するＤＰＰ（「ｃＫＫ－Ｅ１０－ｍｏｏｎｏ－Ｆｌｕ乾燥粉末」）；図１０Ｃ：呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）抗原に由来する抗原をコードするｍＲＮＡを含有するＤＰＰ（「ｃＫＫ－Ｅ１０－ＲＳＶ乾燥粉末」）。同上。実施例８に記載されているように、２～８℃で１０ヶ月間にわたって保存した後の４種の異なるインフルエンザｍＲＮＡ（ＱＩＶ－Ｆｌｕ）を用いて調製されたＤＰＰについて、粒径、ＰＤＩ、封入効率、及びｍＲＮＡ完全性において有意な変化がなかったことを示すグラフである。ＱＩＶ－Ｆｌｕ ｍＲＮＡ（「ＱＩＶ ｍＲＮＡ」；上）、Ｔ０での再構成されたＤＰＰから抽出されたｍＲＮＡ（「乾燥粉末Ｔ０」；中央）、及び２～８℃で５．５ヶ月間保存した後の再構成されたＤＰＰから抽出されたｍＲＮＡ（「乾燥粉末５．５ヶ月」；下）のキャピラリー電気泳動プロファイルを示す。同上。同上。 定義 本開示をより容易に理解するために、特定の用語を最初に下記で定義する。以下の用語及び他の用語についての更なる定義は、本明細書全体を通して示される。本開示の背景を記載し、且つその実施に関する追加の詳細を提供するために本明細書に言及される刊行物及び他の参考資料は、参照により本明細書に組み込まれる。 およそ又は約：本明細書で使用される場合、１つ以上の目的の値に適用される「およそ」又は「約」という用語は、記載された基準値に類似する値を指す。ある特定のいくつかの実施形態では、「およそ」又は「約」という用語は、特に明記しない限り又は文脈から明らかでない限り、記載された基準値のいずれかの方向でも（それより大きい又はそれより小さい）２５％、２４％、２３％、２２％、２１％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、又はそれ未満に入る範囲の値（それらの間の全ての値及び部分範囲を含む）を指す（そのような数があり得る値の１００％を超える場合を除く）。例示的な実施形態では、約５は、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５を指す。 送達：本明細書で使用される場合、「送達」という用語は、局所送達及び全身送達の両方を包含する。例えば、ｍＲＮＡの送達は、ｍＲＮＡが標的組織に送達され、コードされるタンパク質が発現され、標的組織内で保持される状況（「局所分布」又は「局所送達」とも称される）、及びｍＲＮＡが標的組織に送達され、コードされるタンパク質が発現され、患者の循環系（例えば、血清）中に分泌され、系統的に分布し、他の組織によって吸収される状況（「全身分布」又は「全身送達」とも称される）を包含する。いくつかの実施形態では、送達は、経口送達、筋肉内、静脈内、皮下、舌下、又は口腔内送達である。 封入：本明細書で使用される場合、「封入」という用語、又はその文法上の等価物は、核酸分子をナノ粒子内に閉じ込めるプロセスを指す。 封入効率：本明細書で使用される場合、「封入効率」又は「ＥＥ」は、ＬＮＰの調製に使用される治療薬及び／又は予防薬の初期総量と比較して、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）の一部となる、本開示のリボ拡散分子などの治療薬及び／又は予防薬の量を指す。例えば、９７ｍｇの治療薬及び／又は予防薬が、最初に組成物に提供された治療薬及び／又は予防薬の合計１００ｍｇのうち、ＬＮＰに封入される場合、封入効率は９７％として与えられ得る。封入効率は、例えば、ＲｉｂｏＧｒｅｅｎアッセイ又は当該技術分野において公知の任意の方法によって決定され得る。本明細書で使用される場合、「封入」は、完全な、実質的な、又は部分的な囲い、閉じ込め、包囲、又は収容を指し得る。 発現：本明細書で使用される場合、核酸配列の「発現」は、ｍＲＮＡのポリペプチドへの翻訳、複数のポリペプチド（例えば、抗体の重鎖又は軽鎖）のインタクトなタンパク質（例えば、抗体）へのアセンブル及び／又はポリペプチド若しくは完全に構築されたタンパク質（例えば、抗体）の翻訳後修飾を指す。本開示では、「発現」及び「産生」という用語及びそれらの文法上の等価物は、互換的に使用される。 機能的：本明細書で使用される場合、「機能的」生体分子は、それが特徴付けられる特性及び／又は活性を呈する形態の生体分子である。 半減期：本明細書で使用される場合、「半減期」という用語は、核酸又はタンパク質の濃度若しくは活性などの量がある期間の最初に測定されたその値の半分まで落ちるのに必要となる時間である。 平均粒径：本明細書で使用される場合、脂質ナノ粒子組成物に関連する「平均粒径」は、ナノ粒子組成物の平均直径を指す。乾燥粉末製剤中の乾燥粉末に関連する「平均粒径」は、乾燥粉末の平均直径を指す。 改善する、増加する、又は低減する：本明細書で使用される場合、「改善する」、「増加する」又は「低減する」という用語、若しくは文法的な同義語は、本明細書に記載される治療の開始前の同じ個体における測定値又は本明細書に記載される治療がない対照対象（若しくは複数の対照対象）における測定値などのベースライン測定値に対する相対値を示す。「対照対象」は、治療下の対象と同じ形態の疾患に罹患している対象であって、治療下の対象とほぼ同じ年齢の対象である。 改善された熱安定性：本明細書で使用される場合、「改善された熱安定性」という用語は、製剤（例えば、ｍＲＮＡ－ナノ粒子又は再構成されたｍＲＮＡ－ナノ粒子）が高温でその化学構造及び／又は物理的安定性を維持する能力を指す。 いくつかの実施形態では：本明細書で使用される場合、「いくつかの実施形態では」という用語、又は「ある特定の実施形態では」、「他の実施形態では」、「いくつかの他の実施形態では」といったその文法上の等価物は、文脈が明らかにそうでないことを示さない限り、本開示の全ての対応の実施形態を指す。 インビトロ：本明細書で使用される場合、「インビトロ」という用語は、多細胞生物体内ではなく、人工的な環境、例えば、試験管又は反応容器中、細胞培養物中などで起こる事象を指す。 インビボ：本明細書で使用される場合、「インビボ」という用語は、ヒト及び非ヒト動物などの多細胞生物内で起こる事象を指す。細胞をベースとするシステムの文脈では、この用