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JP-2026514993-A - 共受容体キメラ抗原受容体

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Abstract

本発明は、ＬＣＫに結合可能な共受容体キメラ抗原受容体（ＣｏＣＡＲ）、共受容体キメラ抗原受容体とＣＡＲの組合せ、かかるＣｏＣＡＲをコードする核酸コンストラクト、かかるＣｏＣＡＲを発現するように操作された組換え細胞およびそれを含む医薬組成物に関する。本発明は、好ましくは、腫瘍関連抗原の発現を特徴とする疾患の処置におけるその使用をさらに提供する。

Inventors

  • ユーベルハルト，ルドルフ

Assignees

  • ヴァヌディス・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング

Dates

Publication Date
20260513
Application Date
20240429
Priority Date
20230427

Claims (20)

  1. （ｉ）第１の細胞外抗原認識ドメイン、 （ｉｉ）第１のヒンジドメイン、 （ｉｉｉ）第１の膜貫通ドメイン、および （ｉｖ）（ａ）ＬＣＫに結合可能であり、かつ／または （ｂ）ＬＣＫまたはその変異体もしくは断片を含む、少なくとも１つのサイトゾルドメイン を含み、ＣＤ３ゼータドメインを含まない、 共受容体－ＣＡＲ（ＣｏＣＡＲ）。
  2. 第１の抗原認識ドメインがｓｃＦｖである、請求項１に記載のＣｏＣＡＲ。
  3. 標的細胞上の抗原に特異的に結合可能である、前記請求項のいずれか一項に記載のＣｏＣＡＲ。
  4. 第１のヒンジドメインが、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２８、ＩｇＧ－Ｆｃドメインに由来する、前記請求項のいずれか一項に記載のＣｏＣＡＲ。
  5. 第１の膜貫通ドメインが、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２８、ＣＤ４４、ＣＤ１４６またはＣＤ３ゼータ膜貫通ドメインに由来する、前記請求項のいずれか一項に記載のＣｏＣＡＲ。
  6. （ａ）ＬＣＫに結合可能である少なくとも１つのサイトゾルドメインが、 （１）ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ４４もしくはＣＤ１４６細胞内シグナル伝達ドメインまたはその変異体もしくは断片に由来する細胞内シグナル伝達ドメインであるか、または （２）ＬＣＫに結合可能な１つまたは複数のモチーフを含む、 前記請求項のいずれか一項に記載のＣｏＣＡＲ。
  7. ＬＣＫに結合可能なモチーフが、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ４４またはＣＤ１４６細胞内シグナル伝達ドメインに由来する、請求項６に記載のＣｏＣＡＲ。
  8. （ａ）請求項１から７のいずれか一項に記載のＣｏＣＡＲ、および （ｂ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ） の組合せ。
  9. 核酸、または第１および第２の核酸の組合せであって、 （ａ）核酸が、請求項１から７のいずれか一項に記載のＣｏＣＡＲまたは請求項８に記載の組合せをコードし、かつ （ｂ）前記組合せが、請求項８に記載の組合せをコードし、ここで、第１の核酸が、ＣｏＣＡＲ（ａ）をコードし、第２の核酸が、ＣＡＲ（ｂ）をコードする、核酸または第１および第２の核酸の組合せ。
  10. 核酸コンストラクト、または第１および第２の核酸コンストラクトの組合せであって、 （ａ）核酸コンストラクトが、請求項９に記載の核酸または第１および第２の核酸の組合せを含み、ここで、核酸ならびに／または第１および第２の核酸が少なくとも１つの発現制御配列に機能的に連結され、かつ （ｂ）第１および第２の核酸コンストラクトの組合せにおいて、第１の核酸コンストラクトが請求項９に記載の第１の核酸を含み、第２の核酸コンストラクトが請求項９に記載の第２の核酸を含み、第１および第２の核酸が独立に、少なくとも１つの発現制御配列に機能的に連結されている、 核酸コンストラクトまたは第１および第２の核酸コンストラクトの組合せ。
  11. ベクター、または第１および第２のベクターの組合せであって、 （ａ）ベクターが、請求項９に記載の核酸もしくは第１および第２の核酸の組合せおよび／または請求項１０に記載の核酸コンストラクトもしくは核酸コンストラクトの組合せを含み、かつ／または （ｂ）前記組合せにおいて、第１のベクターが前記第１の核酸および／または第１の核酸コンストラクトを含み、第２のベクターが、請求項９および１０に記載の第２の核酸および／または第２の核酸コンストラクトを含む、 ベクターまたは第１および第２のベクターの組合せ。
  12. 請求項９に記載の核酸コンストラクトを含む、組換え細胞。
  13. 免疫エフェクター細胞である、請求項１２に記載の組換え細胞。
  14. 細胞表面にＣｏＣＡＲおよび／または前記組合せを発現する、請求項１２または１３に記載の組換え細胞。
  15. （ｉ）ＣＡＲおよび（ｉｉ）ＣｏＣＡＲが、標的細胞の表面上に発現された同一抗原中に位置する異なるエピトープを認識する、請求項１２から１４のいずれか一項に記載の組換え細胞。
  16. （ｉ）ＣＡＲおよび（ｉｉ）ＣｏＣＡＲが、標的細胞の表面上に発現された異なる抗原を認識する、請求項１２から１４のいずれか一項に記載の組換え細胞。
  17. （ｉ）請求項１から７のいずれか一項に記載のＣｏＣＡＲ、 （ｉｉ）請求項８に記載の組合せ、 （ｉｉｉ）請求項９から１１のいずれか一項に記載の核酸、核酸の組合せ、核酸コンストラクト、核酸コンストラクトの組合せ、ベクターおよび／またはベクターの組合せ、ならびに／または （ｉｖ）請求項１２から１６のいずれか一項に記載の組換え細胞 ならびに薬学的に許容される担体 を含む医薬組成物。
  18. 医薬における使用のための、請求項１から７のいずれか一項に記載のＣｏＣＡＲ、請求項８に記載の組合せ、請求項９から１１のいずれか一項に記載の核酸、核酸の組合せ、核酸コンストラクト、核酸コンストラクトの組合せ、ベクター、ベクターの組合せ、請求項１２から１６のいずれか一項に記載の組換え細胞および／または請求項１７に記載の医薬組成物。
  19. がんの処置における使用のための、請求項１から７のいずれか一項に記載のＣｏＣＡＲ、請求項８に記載の組合せ、請求項９から１１のいずれか一項に記載の核酸、核酸の組合せ、核酸コンストラクト、核酸コンストラクトの組合せ、ベクター、ベクターの組合せ、請求項１２から１６のいずれか一項に記載の組換え細胞および／または請求項１７に記載の医薬組成物。
  20. Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）、ＢＣＭＡ、ＣＤ３、ＣＤ５、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４４、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ１２３、ＣＤ１３８、ＣＤ１７１、ＣＥＡ、クローディン－６、クローディン－１８．２、ＣＬＬ１、ＣＸＣＲ５、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＥＰＨ－受容体Ａ２、ＩＧＬＶ３－２１、ＧＰ－２、ＧＰ－４０、ＨＥＲ２、ＥｒｂＢ３、ＥｒｂＢ４、ＦＢＰ、ＡｃｈＲ、Ｆｒ－ａ、ＧＤ２、ＧＤ３、ＨＭＷ－ＭＡＡ、ＩＬ１３Ｒａ２、カッパ－ＬＣ、ＩＧＬＶ３－２１－Ｒ１１０、ルイスＹ、メソテリン、ＭＵＣ１、ＭＵＣ１６、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＣＡＭ、ＮＹ－ＥＳＯ１、癌胎児抗原ｈ５Ｔ４、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＲＯＲ１、ＴＡＧ－７２、ＶＥＧＦＲ、ＧＯＬＰＨ２およびＳＬＡＭＦ７からなる群から選択される少なくとも１つの腫瘍関連抗原の細胞表面発現を有する悪性腫瘍の処置における、請求項１８または１９に記載のＣｏＣＡＲ、組合せ、核酸、核酸の組合せ、核酸コンストラクト、核酸コンストラクトの組合せ、ベクター、ベクターの組合せ、組換え細胞および／または医薬組成物。

Description

本発明は、共受容体－ＣＡＲ（ＣｏＣＡＲ）、ＣｏＣＡＲとＣＡＲの組合せ、かかる抗原受容体をコードする核酸、かかるＣｏＣＡＲを発現するように操作された組換え細胞およびそれを含む医薬組成物に関する。好ましくは、少なくとも１つの腫瘍関連抗原の発現を特徴とする疾患の処置におけるその使用がさらに開示される。 キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）－Ｔ細胞は、革新的な免疫療法的アプローチに相当し、かかる治療法は、がんの処置に対して非常に大きな可能性を示してきた。ＣＡＲ－Ｔ細胞は、患者由来の自己Ｔ細胞から生成され、自己Ｔ細胞はＣＡＲを発現するように遺伝子改変される。エクスビボでの遺伝子改変および拡大増殖後、ＣＡＲ－Ｔ細胞は患者に再注入され、そこで腫瘍細胞の表面に露出した特定の構造に結合する。ＣＡＲ－Ｔ細胞の抗原特異性は、Ｔ細胞由来膜貫通および細胞内シグナル伝達ドメインに連結された抗体に由来する細胞外抗原結合性ドメイン（例えば、単鎖可変断片、ｓｃＦｖ）を含有する人工的に構築された融合タンパク質であるＣＡＲによって提供される。古典的ＣＡＲは、膜貫通およびシグナル伝達ドメイン、例えば、ＣＤ３ζに融合された抗原特異的単鎖抗体（ｓｃＦｖ）断片からなる。Ｔ細胞中に導入されると、膜結合タンパク質として発現され、そのコグネイト抗原に結合すると免疫応答を誘導する(Eshhar et al., (1993) PNAS, (90) 720-724)。 ＣＡＲは、親のモノクローナル抗体の抗原結合特性を利用し、Ｔ細胞が、非ＭＨＣ制限的に腫瘍細胞の表面に発現された天然抗原に応答することを可能にする。したがって、ＣＡＲ－Ｔ細胞活性化の機序は、従来のＴ細胞のものとは本質的に異なっており、後者は、ＭＨＣ分子によって提示されたプロセシングされたペプチド抗原にもっぱら応答する。ＣＡＲ－Ｔ細胞のＣＡＲ依存性活性化は、抗原発現細胞に対する免疫応答を誘発し、その結果、腫瘍のＴ細胞媒介性破壊が生じる。 現在のＣＡＲ－Ｔ細胞療法は、ＣＡＲによって認識される特異的標的抗原が低密度で発現される場合には制限された有効性を示す。最初に、腫瘍細胞が多量の腫瘍関連抗原を発現することが多いが、治療的介入の存在下で、腫瘍細胞は、その表面上に発現される標的抗原の量を下方調節でき、ＣＡＲがＴ細胞を活性化して腫瘍細胞を死滅させることができなくなるという結果を伴う。他のシナリオでは、ＣＡＲは、抗原密度が正常かまたは高い場合でさえ、Ｔ細胞機能を阻害することがある（例えば、ＣＡＲがＴ細胞疲弊を誘導し、それによって、Ｔ細胞の治療効果を最終的に減弱または終結させる場合）。したがって、依然として、これらの制限を克服して、これらの治療法の適用範囲を増強するために、Ｔ細胞活性化をモジュレートする必要がある。 初期のＣＡＲ設計は、抗原認識ドメインとしての抗体単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）から構成され、これは、ヒンジおよび膜貫通ドメインを介してＴＣＲシグナル伝達成分ＣＤ３ζの細胞質側末端に融合される。第１世代のＣＡＲを発現するＴ細胞は、抗原陽性腫瘍細胞に向けた細胞傷害性を誘導できるが、それらは、持続能力が不十分であるためにインビボで腫瘍増殖を効率的に制御できない(Eshhar et al., (1993) PNAS、(90) 720-724)。現在のＣＡＲ設計は、細胞内ＣＤ３ζＴ細胞活性化ドメインに加えて、１つまたは複数の共刺激ドメインを組み込み、これによって、第２（１つの共刺激ドメイン）および第３世代（２つの共刺激ドメイン）ＣＡＲ構造が分類される。この設計原理は、完全Ｔ細胞活性化を解放するために必要な、シグナル１（ＴＣＲから）およびシグナル２（共刺激受容体から）を組み合わせることであり、実際、これは、インビボ持続性および臨床有効性を著しく改善した。ほとんどの場合、共刺激ドメインは、ＣＤ２８受容体ファミリー（ＣＤ２８、ＩＣＯＳ）または腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）ファミリー（４－１ＢＢ、ＣＤ２７、ＯＸ４０）のいずれかに由来するのに対し、ＣＤ２８／ＣＤ３ζ（２８ｚ）および４－１ＢＢ／ＣＤ３ζ（ＢＢｚ）第２世代ＣＡＲは、臨床試験された細胞製品において最も頻繁に使用される組合せである。注目すべきことに、６種の現在ＦＤＡから承認されているＣＡＲ－Ｔ細胞製品のすべては、第２世代ＣＡＲ設計を使用し、そのうち４種はＢＢｚ、２種は２８ｚシグナル伝達ドメインを含有する。 ＢＢｚ－および２８ｚ－ＣＡＲを用いる増大しつつある実践経験によって、２種のＣＡＲ設計の間の根本的な機能の相違が示され、これが、一方ではＣＡＲ－Ｔ細胞のインビボ持続性に、他方では、抗原感受性に影響を及ぼす。ＢＢｚ－ＣＡＲ－Ｔ細胞は通常、２８ｚ ＣＡＲ－Ｔ細胞と比較して、マウスおよびヒトにおいてインビボ拡大増殖および持続性能力の増強を示し、後者は、患者において１または２カ月より長く持続することは稀である。対象的に、２８ｚ－ＣＡＲは、抗原密度が低い腫瘍ではＢＢｚ－ＣＡＲより優れており、２８ｚ－ＣＡＲ－Ｔ細胞を用いた場合、そのＢＢｚ対応物と比較して、低抗原再発を発症する可能性がより低い。したがって、持続性についての独特な能力を維持しながら、低抗原密度の腫瘍細胞に対する抗腫瘍免疫応答を増強するようにＢＢｚ－ＣＡＲを再操作する必要がある。 ２８ｚ－ＣＡＲは通常、Ｓｒｃ－ファミリーキナーゼＬＣＫのＣＡＲのＣＤ２８エンドドメイン（ｅｎｄｏｄｏｍａｉｎ）との会合に起因する、下流シグナル伝達事象のより迅速な、より大きな規模での活性化を誘導する（Salter et al., (2018) Sci Signal. 11(544)）。ＬＣＫ会合は、基底ＣＡＲ－ＣＤ３ζリン酸化の増加およびより強度な抗原依存的Ｔ細胞活性化を促進し、これは、おそらくは、抗原密度が低下した標的細胞に対するＣＤ２８ベースの抗ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞について観察された高い感受性の主な原因である(Hamieh et al., (2019) Nature、(568) 112-116)。２８ｚ－ＣＡＲは、解糖代謝およびエフェクターＴ細胞様表現型を誘導し、高エフェクター機能に変換されるが、引き換えに、反復刺激後の疲弊が迅速であり、活性化誘導性細胞死が誘導され、インビボでの持続性が低い。実際、２８ｚ－ＣＡＲ－Ｔ細胞は、注入後６０日間より長く持続せず、ＣＡＲ－Ｔ細胞の消失が再発の主要な原因である（Cappell & Kochenderfer、(2021) Nat Rev Clin Oncol. (11) 715-727; Neelapu et al., (2017) N Engl J Med, (377) 2531-2544）。対照的に、ＢＢｚ－ＣＡＲは、刺激後により弱い下流シグナル伝達事象を誘導するが、これは、ＣＡＲの４－１ＢＢエンドドメインが、ＣＡＲシナプスへのＴＨＥＭＩＳ－ＳＨＰ１ホスファターゼ複合体の動員を促進し、そこで、ＳＨＰ１が、ＣＡＲ－ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインのＬＣＫ媒介性リン酸化を減弱するためである（Sun et al., (2020) Cancer Cell, (2) 216-225）。それにもかかわらず、２８ｚ－およびＢＢｚ－ＣＡＲは、高抗原発現を有する標的細胞に対して同等の抗腫瘍応答を誘導するが、ＢＢｚ－ＣＡＲ－Ｔ細胞は、インビボでより良好な拡大増殖および持続性能力を示す。４－１ＢＢエンドドメインをＣＡＲシナプス中に含めることで、脂肪酸酸化代謝が誘導され、ミトコンドリア新生が増大し、それによって、呼吸容量およびＴ細胞記憶様表現型への分化が著しく増強されることが実証されている（Kawalekar et al, (2016) immunity, (2)380-390）。４－１ＢＢのエンドドメインは、古典的および非古典的ＮＦκＢ経路および抗アポトーシス性タンパク質、例えば、ＢＣＬ－２およびＢＣＬ－ＸＬの発現を活性化するＴＲＡＦ１、ＴＲＡＦ２およびＴＲＡＦ３の結合部位を含有するので、ＢＢｚ ＣＡＲ－Ｔ細胞は、疲弊および活性化誘導性細胞死に対してより耐性がある（Li et al., (2018) JCI Insight, (18) 121322）。したがって、ＢＢｚ－ＣＡＲ－Ｔ細胞は、インビボで定着腫瘍に対して持続した抗腫瘍活性を示し、応答性患者では数カ月間または数年間でさえ持続する場合がある（Melenhorst et al., (2022) Nature, (602) 503-509）。Ｂ細胞リンパ腫を有する患者におけるＢＢｚ－および２８ｚ－抗ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞の同時比較は、同様の抗腫瘍効力を示したが、２８ｚ－ＣＡＲ製品は、重症サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および神経毒性を誘導し、これは、２８ｚ－ＣＡＲ－Ｔ細胞のさらなる評価の終結につながった（Ying et al., (2019) Mol Ther Oncolytics、(15) 60-68）。さらに、その２８ｚ対応物と比較して、ＢＢｚ－抗ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞は、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）を有する患者において、より高い抗腫瘍有効性およびより軽度の有害事象をもたらし（Zhao et al, (2020) Mol Ther Oncolytics, (18) 272-281）、血液悪性腫瘍の処置においてＢＢｚ－ＣＡＲの優れた機能を示した。しかし、ＢＢｚ－ＣＡＲ－Ｔ細胞では再発が良く見られるが、そのほとんどは抗原逃避と呼ばれる機序のためであり、標的抗原数の低減を示すかまたは抗原発現を完全に失った再発性腫瘍細胞を指す。例えば、多発性骨髄腫を有する患者において抗ＢＣＭＡ ＢＢｚ－ＣＡＲ－Ｔ細胞を用いる臨床試験は、低レベルのＢＣＭＡを発現する腫瘍細胞の増殖を実証した（Brudno et al., (2018) J Clin Oncol, (22) 2267-2280; Cohen et al., (2019) J Clin Invest, (6) 2210-2221）。さらに、ｍ９７１抗原認識ドメインを利用する抗ＣＤ２２ ＢＢｚ－ＣＡＲ－Ｔ細胞は、前臨床モデルにおいて高度に効率的な抗腫瘍応答を示し（Haso et al, (2013) Blood, (7) 1165-1174）、Ｂ－ＡＬＬ患者において７０％超の完全奏効率を誘導したが、応答性患者の大部分が、ＣＤ２２抗原密度が低減した腫瘍細胞の増殖のために再発した（Fry et al., (2017) Nat Med, (1) 20-28; Shah et al., (2020) J Clin Oncol. (17) 1938-1959）。Ｂ－ＡＬＬ腫瘍細胞株Ｎａｌｍ６の操作された変異体を使用する前臨床モデリングは、細胞あたりおよそ１，８００個の分子へＣＤ２２部位密度を低減することが、抗ＣＤ２２ ＢＢｚ－ＣＡＲ－Ｔ細胞による根治的抗腫瘍応答を鈍化させるのに十分であることを示した（Fry et al., (2017) Nat Med, (1) 20-28）。抗原密度が低減した標的細胞に対するＢＢｚ－ＣＡＲ－Ｔ細胞の同様の不十分な反応性はまた、抗ＣＤ１９および抗ＧＰＣ２ ＣＡＲを含む他の特異性についても示され、それぞれ、細胞あたり２，０５３のＣＤ１９および６，０００のＧＰＣ２分子を有する腫瘍細胞を根絶できなかった（Majzner et al.,(2020) Cancer Discov. (5) 702-723; Heitzeneder et al, (2022) Cancer Cell, (1) 53-69）。これらの結果は、細胞あたり数千分子への抗原発現低下が、ＢＢｚ－ＣＡＲ－Ｔ細胞に対する耐性の一般的な原因であり、低抗原標的細胞に対するＢＢｚ－ＣＡＲの不十分な感受性を示すことを示す。したがって、ＢＢｚ－ＣＡＲを拡大増殖および持続性のための能力を保ちながらその感受性を増強するように再操作することによって