KR-102959889-B1 - 동물 미오글로빈을 포함하는 육류 대체물

Abstract

동물 미오글로빈 단백질을 포함하는 육류 대체물 또는 식품 성분, 상기 단백질을 인코딩하는 핵산을 포함하는 유전자 작제물, 상기 유전자 작제물을 포함하는 숙주 세포 및 상기 미오글로빈 또는 상기 육류 대체물을 생산하는 방법이 본원에 기재되어 있다.

Inventors

• 샌크토럼, 헤르메스
• 드 종, 앤디

Assignees

• 팰리오 비.브이.

Dates

Publication Date

20260506

Application Date

20211230

Priority Date

20201231

Claims (20)

1. 매머드로부터 유래된 동물 미오글로빈을 포함하는 육류 대체물.
2. 제1항에 있어서, 상기 미오글로빈은 털 매머드로부터 유래된 것인, 육류 대체물.
3. 제2항에 있어서, 상기 미오글로빈은 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 것인, 육류 대체물.
4. 제1항에 있어서, 상기 미오글로빈은 대초원 매머드로부터 유래된 것인, 육류 대체물.
5. 제4항에 있어서, 상기 미오글로빈은 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 것인, 육류 대체물.
6. 제1항에 있어서, 대두 식물의 뿌리 혹에서 공생하는 박테리아에 의해 생성된 레그헤모글로빈을 포함하지 않고/않거나, 유일한 헴-함유 단백질로서 제1항에 정의된 바와 같은 미오글로빈을 포함하는, 육류 대체물.
7. 제1항에 정의된 바와 같은 미오글로빈을 인코딩하는 핵산을 포함하는 유전자 작제물로서, 상기 핵산은 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 유전자 작제물: (a) 서열번호 9, 10, 또는 11의 뉴클레오티드 서열; 및 (b) 유전자 코드의 축퇴성으로 인해 (a)의 뉴클레오티드 서열의 서열과 다른 서열을 갖는 뉴클레오티드 서열.
8. 제7항에 있어서, 프로모터를 추가로 포함하는, 유전자 작제물.
9. 제7항에 있어서, 신호 펩티드를 추가로 포함하는, 유전자 작제물.
10. 제7항에 있어서, 발현된 미오글로빈의 배설을 촉진하는 신호 펩티드를 추가로 포함하는, 유전자 작제물.
11. 제7항에 있어서, 상기 뉴클레오티드 서열은 서열번호 19로 표시되는, 유전자 작제물.
12. 제11항에 있어서, 상기 유전자 작제물은 서열번호 25로 표시되는, 유전자 작제물.
13. 제7항에 정의된 바와 같은 유전자 작제물을 포함하는 벡터.
14. 제7항에 정의된 바와 같은 유전자 작제물을 포함하는 숙주 세포.
15. 제14항에 있어서, 원핵생물 또는 진핵생물인, 숙주 세포.
16. 제14항의 숙주 세포를 적합한 배지에서 배양하는 단계 및 선택적으로 숙주 세포 및/또는 미오글로빈을 회수하는 단계를 포함하는, 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 미오글로빈을 생산하는 방법.
17. 제16항에 있어서, 상기 생산된 미오글로빈은 신호 펩티드를 포함하지 않는, 방법.
18. 제16항에 있어서, 상기 회수된 미오글로빈은 정제되는, 방법.
19. 제16항에 있어서, 상기 숙주 세포는 미오글로빈을 세포외로 생산하는, 방법.
20. 제16항의 방법으로부터 수득할 수 있는 미오글로빈을 육류 대체물로 제형화하는 단계를 포함하는, 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 육류 대체물을 제조하는 방법.

Description

동물 미오글로빈을 포함하는 육류 대체물 본원에 기재된 양태 및 구현예는 미오글로빈 단백질을 포함하는 육류 대체물, 상기 단백질을 인코딩하는 핵산을 포함하는 유전자 작제물, 상기 유전자 작제물을 포함하는 숙주 세포 및 상기 미오글로빈 또는 상기 육류 대체물을 생산하는 방법 분야에 관한 것이다. 여러 육류 대체물이 이미 개발되어 상용화되었다. 이러한 제품의 풍미, 색상, 질감 및 영양적 품질은 "육류"를 적절하게 모방하지 않는다는 점에서 항상 최적인 것은 아니다. 게다가, 이러한 제품은 또한 육류와 동일한 영양적 품질을 가지고 있지 않을 수 있다. 따라서 육류 대체를 목표로 하는 기존 식료품의 단점을 모두 제거한 새로운 발명품이 여전히 필요하다. 따라서, 본원에 기재된 바와 같은 본 발명의 양태 및 구현예는 본원에 논의된 바와 같은 문제 및 요구 중 적어도 일부를 해결한다. 육류 대체물 제1 양태에서, 동물 미오글로빈, 바람직하게는 포유동물 미오글로빈, 더 바람직하게는 매머드, 돼지, 양 또는 소(더 바람직하게는 상기 매머드는 털 매머드(woolly mammoth)(Mammuthus primigenius, 맘무투스 프리미게니우스) 또는 대초원 매머드(steppe mammoth)(Mammuthus trogontherii, 맘무투스 트로곤테리)이고, 가장 바람직하게는 상기 매머드는 대초원 매머드임)로부터의 미오글로빈, 또는 조류(바람직하게는 닭) 미오글로빈, 또는 어류(바람직하게는 참치) 미오글로빈, 또는 이들로부터 유래된 미오글로빈을 포함하는 육류 대체물 또는 식품 성분이 제공된다. 일 구현예에서, 육류 대체물 또는 식품 성분은 매머드, 돼지, 양, 소, 닭 또는 참치로부터의 또는 이들로부터 유래된 동물 미오글로빈을 포함하고, 바람직하게는 상기 매머드는 털 매머드(Mammuthus primigenius) 또는 대초원 매머드(Mammuthus trogontherii)이고, 더 바람직하게는 상기 매머드는 대초원 매머드이다. 동물 미오글로빈은, 이의 아미노산 서열이 각각 적어도 하나의 아미노산의 첨가, 결실 및/또는 치환에 의해 매머드(바람직하게는 털 매머드, 또는 대초원 매머드), 돼지, 양, 소, 닭 또는 참치 중 하나로부터 유래될 때, 매머드(바람직하게는 털 매머드 또는 대초원 매머드, 더 바람직하게는 대초원 매머드임), 돼지, 양, 소, 닭 또는 참치 미오글로빈으로부터 유래되었다고 말할 수 있다. 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개의 아미노산의 첨가, 결실 및/또는 치환도 또한 본 발명에 의해 고려된다. 털 매머드, 대초원 매머드, 돼지, 양, 소, 닭 또는 참치로부터의 미오글로빈 아미노산 서열의 예는 주어진 서열번호에 의해 이후에 개시되었다. 매머드, 털 매머드, 대초원 매머드, 돼지, 양, 소, 닭 또는 참치 미오글로빈에서 유래된 이러한 동물 미오글로빈은 또한 본원에서 이후에 설명되는 바와 같이 적어도 검출가능한 수준의 동물 미오글로빈 활성을 발휘할 수 있다. 달리 명시적으로 언급되지 않는 한, 매머드는 본 출원의 맥락에서 털 매머드(Mammuthus primigenius) 또는 대초원 매머드(Mammuthus trogontherii)와 같은 매머드(Mammuthus) 속의 임의의 종일 수 있다. 일 구현예에서, 육류 대체물 또는 식품 성분 내의 미오글로빈은 매머드의 것이거나 이로부터 유래된 것이다. 바람직한 구현예에서, 육류 대체물 또는 식품 성분 내의 미오글로빈은 털 매머드의 것이거나 이로부터 유래된 것이다. 바람직한 구현예에서, 육류 대체물 또는 식품 성분 내의 미오글로빈은 대초원 매머드의 것이거나 이로부터 유래된 것이다. 일 구현예에서, 육류 대체물 또는 식품 성분 내의 미오글로빈은 다음 아미노산 서열 중 하나로 표시된다: - a) 서열번호 3과 적어도 70%의 서열 동일성을 포함하고 다음 아미노산 조합 중 적어도 하나를 갖는 아미노산 서열: o 위치 30에서 F, 및/또는 o 위치 65에서 Q, 및/또는 o 위치 92에서 H, 및/또는 o 위치 94에서 H, 및/또는 o 위치 30에서 F 및 위치 65에서 Q, 및/또는 o 위치 30에서 F 및 위치 92에서 H, 및/또는 o 위치 30에서 F 및 위치 94에서 H, 및/또는 o 위치 65에서 Q 및 위치 92에서 H, 및/또는 o 위치 65에서 Q 및 위치 94에서 H, 및/또는 o 위치 92에서 H 및 위치 94에서 H, 및/또는 o 위치 30에서 F 및 위치 65에서 Q 및 위치 92에서 H, 및/또는 o 위치 30에서 F 및 위치 65에서 Q 및 위치 94에서 H, 및/또는 o 위치 30에서 F 및 위치 92에서 H 및 위치 94에서 H, 및/또는 o 위치 65에서 Q 및 위치 92에서 H 및 위치 94에서 H, 및/또는 o 위치 30에서 F 및 위치 65에서 Q 및 위치 92에서 H 및 위치 94에서 H; - b) 서열번호 2 또는 3과 적어도 70%의 서열 동일성을 포함하고, 위치 65에서 Q 또는 H 및 위치 94에서 H를 포함하고 선택적으로 서열번호 2 또는 3 내의 다음 위치에서 다음 아미노산 중 적어도 하나를 갖는 아미노산 서열: 위치 9에서 E, 위치 13에서 K, 위치 14에서 T, 위치 23에서 P, 위치 27에서 L, 위치 31에서 V, 위치 54에서 G, 위치 65에서 Q, 위치 67에서 V, 위치 84에서 Q, 위치 88에서 Q, 위치 102에서 I, 위치 123에서 E 및/또는 위치 143에서 I; - c) 서열번호 1과 적어도 70%의 서열 동일성을 포함하고, 위치 65에서 Q 또는 H 및 위치 94에서 H를 포함하고 선택적으로 서열번호 1 내의 다음 위치에서 다음 아미노산 중 적어도 하나를 갖는 아미노산 서열: 위치 9에서 E, 위치 13에서 K, 위치 14에서 T, 위치 23에서 P, 위치 27에서 L, 위치 31에서 V, 위치 54에서 G, 위치 65에서 Q, 위치 67에서 V, 위치 84에서 Q, 위치 88에서 Q, 위치 102에서 I 및/또는 위치 123에서 E; - d) 서열번호 4, 5 또는 6과 적어도 70%의 동일성을 포함하고, 위치 65에서 Q 또는 H 및 위치 94에서 H를 포함하고 선택적으로 서열번호 4, 5 또는 6 내의 다음 위치에서 다음 아미노산 중 적어도 하나를 갖는 아미노산 서열: 위치 13에서 N, 위치 27에서 Q, 위치 31에서 I, 위치 67에서 N, 위치 128에서 A, 위치 133에서 S, 위치 145에서 A 및/또는 위치 150에서 L; - e) 서열번호 7과 적어도 70%의 동일성을 포함하고, 위치 65에서 Q 또는 H 및 위치 94에서 H를 포함하고 선택적으로 서열번호 7 내의 다음 위치에서 다음 아미노산 중 적어도 하나를 갖는 아미노산 서열: 위치 6에서 Q, 위치 10에서 Q, 위치 13에서 T, 위치 14에서 I, 위치 27에서 H, 위치 31에서 M, 위치 35에서 H, 위치 36에서 D, 위치 42에서 D, 위치 43에서 R, 위치 49에서 G, 위치 53에서 P, 위치 55에서 Q, 위치 58에서 G, 위치 67에서 A, 위치 72에서 Q, 위치 75에서 K, 위치 79에서 Q, 위치 82에서 N, 위치 85에서 S, 위치 93에서 T, 위치 111에서 V, 위치 116에서 I, 위치 117에서 A, 위치 118에서 E, 위치 121에서 A, 위치 128에서 S, 위치 133에서 K, 위치 145에서 S 및/또는 위치 150에서 F; 또는 - f) 서열번호 8과 적어도 70%의 동일성을 포함하고, 위치 65에서 Q 또는 H 및 위치 94에서 H를 포함하는 아미노산 서열. 서열번호 1은 털 매머드 미오글로빈의 아미노산 서열의 일부를 나타내고, 서열번호 2는 털 매머드의 아미노산 서열을 나타내고; 서열번호 3은 대초원 매머드 미오글로빈의 아미노산 서열을 나타내고, 서열번호 4는 양 미오글로빈의 아미노산 서열을 나타내고, 서열번호 5는 소(암소) 미오글로빈의 아미노산 서열을 나타내고, 서열번호 6은 돼지 미오글로빈의 아미노산 서열을 나타내고, 서열번호 7은 닭 미오글로빈의 아미노산 서열을 나타내고, 서열번호 8은 참치 미오글로빈의 아미노산 서열을 나타낸다. 털 매머드 미오글로빈의 아미노산 서열의 일부(즉, 부분 서열)를 나타내는 서열번호 1이 털 매머드의 미오글로빈의 (전체) 아미노산 서열을 나타내는 서열번호 2에 포함된다는 것은 명백하다. 서열번호 9는 서열번호 1을 코딩하는 핵산 서열이다. 서열번호 10은 서열번호 2를 코딩하는 핵산 서열이고, 서열번호 11은 서열번호 3을 코딩하는 핵산 서열이다. 서열번호 12는 서열번호 4를 코딩하는 핵산 서열이다. 서열번호 13은 서열번호 5를 코딩하는 핵산 서열이다. 서열번호 14는 서열번호 6을 코딩하는 핵산 서열이다. 서열번호 15는 서열번호 7을 코딩하는 핵산 서열이다. 서열번호 16은 서열번호 8을 코딩하는 핵산 서열이다. 육류 대체물은 정의에 따라 육류가 아니고 천연 육류가 아니며 진짜 육류가 아니다. 육류 대체물은 비-자연 발생 식품 또는 식용 제품으로 간주될 수 있다. 이는 본 발명의 맥락에서 육류 대체물이 돼지, 양, 소, 닭 또는 참치(또는 매머드가 여전히 존재하는 경우 매머드의 것이거나 이로부터 유래된 것(현실은 아님))의 육류이거나 이로부터 유래된 육류가 아님을 의미한다. 육류 대체물은 육류 모조품 또는 육류 유사 제품 또는 육류 같은 제품과 동의어이다. 육류 대체물은 육류와 동일한 양태(예를 들어, 패턴, 레터링), 형태, 구조, 조성(예를 들어, 유사한 지방, 단백질 및/또는 헴 철 함량), 질감, 색상, 풍미, 향 및/또는 외관을 가질 수 있다. 대안적으로, 이는 육류의 것과 구별되는 양태, 형태, 구조, 질감, 색상, 풍미, 향 및/또는 외관을 가질 수 있다. 육류 대체물은 액체, 고체, 반-고체 식료품으로 제형화될 수 있다. 액체 식료품의 적합한 예는 수프를 포함한다. 고체 식료품의 적합한 예는 세포-기반 육류 또는 배양 육류 또는 식물-기반 육류를 포함한다. 이러한 식물-기반 육류는 대두 단백질과 같은 식물 단백질을 포함할 수 있다. 또한 이들은 본원에 정의된 동물 미오글로빈을 포함한다. 일 구현예에서, 이러한 동물 미오글로빈은 헴-함유 단백질의